NY∕T 2727-2015 蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程(农业)
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ID： |
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文件大小(MB)： |
0.16 |
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8 |
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日期： |
2021-12-25 |
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ICS 65.020,B 16 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 2727一2015,蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程,Guideline for insecticide resistance monitoring of,Bemisia tabaci (Gennadius) on vegetables,2015-05-21 发布2015-08-01 实施,中华人民共和国农业部发布,前言,本标准按照GB/T 1. 1-2009 给出的规则起草,本标准由农业部种植业管理司提出并归口,NY/T 2727-2015,本标准起草单位:全国农业技术推广服务中心、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、天津市植保植,检站,本标准主要起草人:张帅、张友军、邵振润、王少丽、杨爱宾、谢文,I,NY/T 2727-2015,蔬菜烟粉虱抗药性监测技术规程,1 范围,本标准规定了琼脂保湿浸叶法对烟粉虱[Bemisia tabaci (Gennadius) ]成虫、浸茎系统测定法和叶,片浸渍法对烟粉虱若虫和卵抗药性的监测方法,本标准适用于烟粉虱成虫、若虫和卵对常用杀虫剂的抗药性监测,2 术语和定义,下列术语和定义适用于本文件,2. 1,琼脂保湿浸叶法leaf dipping method,将浸过药液的叶碟放在玻璃管底部平铺的固体琼脂上，昆虫通过接触和取食带毒叶片而进行生物,测定的方法,2. 2,浸茎系统测定法stem dipping method,将带有供试昆虫的植物茎部插人装有药液的玻璃瓶中饲养，昆虫通过取食进入植物体内并传导扩,散的药剂而进行生物测定的方法,2. 3,叶片浸渍法leaf-pest dipping method,将带有供试昆虫的植物叶片浸渍在药液中，昆虫通过接触药液和取食叶片而进行生物测定的方法,3 试剂与材料,3. 1 生物试材,试虫:烟粉虱成虫、若虫和卵,供试植物:甘蓝苗和棉花苗。成虫采用甘蓝叶片，若虫和卵采用棉花苗,3. 2 试验药剂,杀虫剂原药,3. 3 试验试剂,Triton X - 100(或吐温80); 丙酣(对不易洛解的药剂，可添加其他助榕剂) ;所用试剂为分析纯，水,为蒸馆水,4 仪器设备,电子天平(感量0.1 mg);,打孔器(直径2.2 cm);,平底玻璃管(长7.8 cm ，直径2.2 cm);,微波炉;,移液器(5 mL);,容量瓶Cl OmL 、50mL 、100mL 、500 mL);,量筒(500 mL);,NY/T 2727一2015,烧杯(1 0 mL 、25 mL 、100mL 、500 mL);,塑料培养皿(直径5 cm);,吸虫器;,棕色玻璃瓶。OmL);,显微镜;,人工气候箱:温度(25 士l) OC 、相对湿度60%~80% 、光照周期16 h : 8 h(L : D),5 试验步骤,5. 1 试材准备,5. 1. 1 无虫苗培育,5. 1. 1. 1 甘蓝苗的培育,将甘蓝籽播种到装好土的托盘里，盖上塑料布，无虫温室内培育， 4 d~5 d 后出苗，待甘蓝苗生长,20 d~30 d 后，即4 片~5 片真叶后进行分苗，在营养钵内单独培育，供测试用,5. 1. 1.2 棉花苗的培育,将催芽后的棉籽播种到装好士的苗盆里，元虫温室内培育，待棉苗长出第1 片真叶，叶片直径2cm,时，从根部切断棉苗，使棉茎长度为10 cm ，插入水中培养待用,5. 1. 2 试虫准备,选当地具有代表性的农田2 块~3 块，每块田随机10 点采集，每地采集烟粉虱成虫至少1000 头放,置于玻璃试管内，或采集带有伪踊的植物叶片200 片以上，带回室内饲养，鉴定烟粉虱的生物型,接虫产卵:将棉苗放于改造过的培养皿中。培养皿改造方法如下:培养皿盖中央开一个直径3cm,的圆孔，用直径约4cm 的60 目~100 目纱网将培养皿的孔封上。在培养皿底盖侧边对应位置各开一个,直径约为1cm 的半圆，内侧贴上海绵封口，在半圆的中间位置将海绵切开一条缝隙，一侧用于放置棉,茎，另一侧用于接虫。每皿接入15 对雌雄成虫产卵， 24 h 后移去成虫，显微镜下记录每个叶片背面卵的,数目，至少20 粒,5. 2 药剂配制,5.2. 1 琼脂玻璃管的制作,用三角瓶配制15 g/L~17 g/L 的琼脂，用微波炉充分榕解。取出后晾5 min~ 10 min ，至瓶口无热,气涌出。用微量移液器吸取2mL 液体琼脂，加入到平底玻璃管底部，冷却凝固后待用,5. 2. 2 药剂溶解和配制,准确称取一定量的原药，用有机榕剂搭解，加入终浓度0.1% TritonX-100C 或0.1% 吐温- 80) 定,容，配制成母液。用移液管吸取母液，用Triton 水济液按照等比梯度配制成5 个~7 个系列浓度。每个,浓度药液量不少于250mL,5. 3 处理方法,5. 3. 1 叶碟制作及浸药,用打孔器将新鲜、平展的甘蓝叶片打成直径2.2 cm 叶碟，避开叶脉部位。将叶碟浸于待测药液中,10 s 后取出晾干，叶背向上平铺于琼脂玻璃管中。按浓度从低到高的顺序重复上述操作，每处理不少于,4 次重复，并设不含药剂的Triton 水溶液作空白对照,5. 3. 2 接虫与计数,5. 3. 2. 1 烟粉虱成虫,琼脂保湿浸叶法:将铺好叶碟的玻璃管，管口朝下倾斜放在有烟粉虱成虫的寄主植物上，轻拍植株,或用吸虫器等使烟粉虱进入管内，每管20 头~25 头，将棉塞塞至距离管底1. 5 cm 处。接虫30 min 后,记录每管内的活虫数(即总虫数),NY/T 2727-2015,5.3.2.2 烟粉虱卵,将带卵棉苗置于显微镜下检查记录每叶卵数……
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